一种测试新的动脉粥样硬化斑块内肥大细胞表征的方法

研究人员使用一种新的流式细胞仪分析方法，设计出一种精确的方法，通过独特的表面蛋白鉴定这些斑块内肥大细胞的特定亚群，并确定其激活机制。对这些动脉粥样硬化介质的详细了解为开发人类动脉粥样硬化的新疗法提供了重要机会。

发表在“细胞”杂志上的研究结果建立在之前的研究基础上，该研究已经确定了CD117+FcεRI+斑块内肥大细胞亚型在斑块发育，进展和去稳定中的特定作用。然而，它们的表征以前依赖于免疫组织化学，其仅通过少数表面标记物表征细胞身份。

反过来，这限制了科学家精确表征肥大细胞的能力，包括其激活状态的知识。现在，Kritikou等人开发了基于流式细胞仪的方法。，已经启用了基于多标记的特定肥大细胞类型的鉴定，以及它们在人动脉粥样硬化斑块中存在的激活状态。

用免疫组织化学和流式细胞仪检测

Kritikou教授及其团队开发了一种新的流式细胞术方法，可以使用多种细胞标记准确确定肥大细胞的身份和活化状态。Kritikou和她的团队一起描述了它们在动脉粥样硬化中的病理作用的激活机制。

已知肥大细胞活化主要通过与其高亲和力受体FcεRI结合的抗体IgE的复合物发生。这使它们对抗原结合敏感。响应于抗原，IgE-FcεRI复合物的交联激活肥大细胞，最终释放免疫应答介质。

Kritikous的数据证实，这种经典模型提供了斑块内肥大细胞的主要激活机制。这些活化IgE片段的进一步表征揭示了它们在斑块组织中的位置，证实了循环IgE水平与灾难性心血管事件之间的相关性。他们的研究表明IgE是心血管事件发生的危险因素，并提供了对过敏和动脉粥样硬化如何联系的理解。

Kritikou和她的团队分析了从患者的股动脉和颈动脉部位收集的22个动脉粥样硬化斑块样本。进行免疫组织化学染色以鉴定肥大细胞。随后用针对特征性表面标志物(CD45，CD117，FcεRI，CD117和IgE)的荧光标记物以及在肥大细胞活化时释放的颗粒介质，类胰蛋白酶进行抗体染色，用于流式细胞术分析。为了确定它们的活化状态，研究人员筛选了共同存在的CD63，一种脱颗粒的介质和一种脱颗粒的敏化剂IgE。

流式细胞术的使用使得几种标记物能够用于鉴定负责促进患者的动脉粥样硬化进展的肥大细胞的特定亚群。进一步的激活筛查显示，来自两个位置的肥大细胞均为两种标记物IgE和CD63阳性，表明它们具有高度活化状态;人类动脉粥样硬化进展的已知标志物。

在没有任何结合在表面的IgE片段的情况下，少部分斑块内肥大细胞被激活。这一发现使研究人员得出结论，CD117+FcεRI+斑块内肥大细胞亚型激活的主要手段是通过IgE与FcεRI的结合而发生的，而少量细胞是独立于IgE而激活的。正如Kritikou和研究人员所说，这些研究结果通过针对人类动脉粥样硬化中IgE介导的作用为潜在的治疗干预铺平了道路。”，